TP ADN a l'aide svp !! ^^

Technique de fractionnement, purification, d'identification voir de dosage.

On sépare les constituants d'une solutions en utilisant leur charge, masse moléculaire, etc.

Et pour cela, on met la solutions en présence d'un chant électrique ( donc les molécules chargé négativement vont vers l'anode et celle chargé positivement vont vers la cathode ).

C'est le principe d'une électrophorèse que tu comprends pas?
Et le reste du tp conciste à quoi?

tony64150 a écrit :

etant donné que l'ADN est différent pour tous il n'y a pas le meme nombre de molécule qui vont aller vers l'anode et la cathode ? non ?



En fait non ^^

L'ADN est une molécule très longue, donc impossible de faire de l'électro sur une molécule d'adn.
On utilise des enzyme de restruction qui vont sectionner l'adn en des motifs précis (palindrome etc ...) ce qui va donner des segments plus ou moins grand. Dans le cas des maladies génétiques par exemple, les mutations font que les ER ne peuvent plus forcément couper car une base à changer. Donc au lieu d'avoir par exemple 3 segment on en plus que 2.

Ensuite ce qui fait leur ségrégation dans la plaque d'agarose (ou de polyacrylamide) (par exemple) c'est que ces plaque sont poreuse, mais les diamètres de ses pores sont plus ou moins grands. Donc une molécule comme l'adn (cargé moinsà se dirige logiquement vers l'anode, mais plus le segments est petit plus il peut se faufilé dans la plaque d'agarose et donc se rapprocher de l'anode. Quand on arrête le champ on obtient un truc comme ça :

ANODE (attire les anions)

-- 10 kDa

------ 20kDa





--------------------- 1500 kDa



Les Dalton (Da) étant une unité de masse moléculaire.
Les pointillées représentant des brin d'adn.

Pour les protéines, il faut d'abord les dénaturer (elles se déplient) à l'aide d'une molécule (type SDS qui elle confère des charges négatives en grandes quantiés).
On peut aussi se passer de SDS et dans ce cas avec une dénaturation neutre.